溶瘤病毒药效服务系列 | 第三章 · 水疱性口炎病毒(VSV)

时长:2023-10-20 16:26

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VSV的病毒学特征及其溶瘤机制

水疱性口炎病毒(VSV)是一种非致病性、有包膜的负链RNA弹状病毒,主要感染啮齿类动物、牛、猪和马等[1],在人群中的流行率极低,仅有个别动物饲养员和实验室人员的感染案例。感染后症状轻微或无症状。

VSV可以感染几乎所有类型的细胞,但由于I型干扰素(Interferons,IFN)介导的抗病毒反应,无法在健康细胞中引发生产性感染。然而,IFN信号缺陷通常与肿瘤发生同时发生[2-3]。因此,VSV能够感染并选择性地破坏癌细胞,而对正常细胞的损伤最小,同时,普通人群的抗VSV免疫较低这些特性使其成为理想的溶瘤病毒治疗剂[4]

VSV基因组全长11161nt,从3'端到5'端依次编码5个蛋白:核衣壳蛋白(Nucleocapsid Protein,N)、磷蛋白(Phosphor Protein,P)、基质蛋白(Matrix Protein,M)、糖蛋白(Glycol Protein,G)及大聚合酶蛋白(Large Polymerase Protein,L)[5]。其包膜上的G蛋白通过与多种广泛存在于细胞膜表面的分子结合,启动病毒的感染过程[6]。M蛋白被证明可以抑制先天抗病毒反应并改变宿主转录机制,最终迫使肿瘤细胞发生凋亡[7]。VSV广泛的细胞趋向性是基于G蛋白,为提高VSV的溶瘤载体的安全性和选择性,通常用其他病毒的膜蛋白取代[8]
 

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图1:VSV的构成还有分析的抗癌肿体系

DOI:10.13523/i.cb.2001014
 

VSV作为溶瘤病毒的优势及局限性

2000年,Stojdl等[9]首次证实了VSV作为溶瘤病毒的潜力,他们发现在裸鼠上VSV能够明显抑制黑色素瘤的生长,而对正常组织细胞的影响很小。随后在多种肿瘤模型中也同样证实了VSV的溶瘤特性[10]。VSV作为溶瘤病毒拥有诸多优势:

(1) 复制到期限短,从感柒到子代病毒码感染的生产仅需2~3一小时,是可以在短期间内生产高滴度的子代病毒码感染;

(2) G核蛋白介导的设别沾染体制使VSV更具非常广泛的组织结构嗜性,可靶向疗法许多种癌生殖细胞;

(3) 人类文明那自然感化VSV的概率计算超低,绝大部分组织细胞不的存在真对VSV的抵抗能力;

(4) VSV能够在肿瘤微环境中的缺氧条件下正常复制。发挥其肿瘤杀伤作用[11];

(5) 宏病毒基因基因遗传组小,且其逆向基因遗传学论述对比成熟稳重,可以展开定向生改装。

 
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图2:溶瘤病毒感染方式的通常分析

该图风采展示了食用VSV最为溶瘤蠕虫病毒样本凭借溶瘤蠕虫病毒样本制疗制疗癌症晚期的通常情况下帮助最简单的方法。一些图象描写了恶劣生殖受损细胞任何时候间的感梁和溶瘤帮助,随后不久是侵袭清空领域的生殖受损细胞的免疫细胞促使。

 

VSV溶瘤病毒的开发方向

尽管VSV在肿瘤治疗中拥有诸多优点,但野生型VSV仍然存在很多缺陷,这也是要对其进一步改造优化的原因。首先是安全性问题,主要表现为VSV潜在的神经毒性,已有大量研究证实了在啮齿动物模型中VSV颅内给药[12]、鼻腔给药[13]、血管内给药[14]以及腹腔给药[15]所导致的神经病变,而且在灵长类动物的丘脑给药中也观察到了严重的神经毒性[16];其次是病毒在机体存留时间较短影响溶瘤效果。在溶瘤治疗时往往需要进行多次给药,但VSV-G蛋白极易引起机体产生适应性免,重复给药时机体内存在的大量针对VSV的中和抗体会导致VSV迅速被清除而达不到理想的治疗效果,所以现阶段的研究都致力于提高rVSV的抗肿瘤活性及其安全性。
 

降底精神致癌性,升高健康性

VSV关健血清表观遗传的整改天然的型VSV的运动精神毒副用核心前者M血清的生殖细胞破坏力用和G血清的嗜运动精神性相关的,对这多个血清表观遗传的整改,是减小VSV运动精神毒副用的核心目标。研究表明,将VSV-M蛋白上第51个氨基酸甲硫氨酸删除(VSVrM51)或将其替换成精氨酸(rM51R-M),能够解除M蛋白对感染细胞干扰素表达的抑制作用,从而提高病毒在正常组织细胞中的安全性[17-18]

Janelle等[19]研究发现VSV的G蛋白突变病毒株(G5、G5R、G6和G6R),可以达到M蛋白突变(rM51R-M)类似的效果,即干扰素表达上升,神经毒性明显减弱;Roberts等[20]通过对G蛋白进行从第29个氨基酸到第9个氨基酸(CT9)或第1个氨基酸(CT1)的截短降低了VSV在神经系统中的复制能力;Duntsch等[21]的研究中利用删除了G蛋白基因的重组VSV载体(rVSV-rG)在瞬时表达VSV-G的细胞中包装获得单周期复制的病毒颗粒,体外实验证明其对正常神经元毒副作用极小,且对神经胶质瘤的杀伤作用不亚于野生型VSV。

 

廷长VSV身体里存留时间间隔

溶瘤蠕虫细菌码在妇科感染肉瘤神经元并对其破坏的历程中,此外也会引发有设备对蠕虫细菌码其实质就的免疫表面抗原想法,有设备内的巡环表面抗原、非活性朋友宿主细胞蛋清质或补体蛋清质结合蠕虫细菌码颗粒物,会形成其被快捷清楚,不可能影响力溶瘤开展的效果。

目前有很多策略,首先是使用人体细胞质粒载体递送、适体技木、PEG共价淡化等方式方法,使VSV在到达肿瘤部位前被暂时隔离,从而减少血液循环中VSV与中和抗体的接触以及被非特异性宿主蛋白或补体蛋白等中和,避免病毒被免疫系统过早清除。Tesfay等[22]通过被动免疫VSV中和抗体的方式证实了VSV的PEG化有效延长病毒在小鼠体内半衰期。第二种策略是经由转换身体内部抗体微情况,使其更方便VSV的复刻。Muik等[23]利用嵌合病毒的方式,将不易诱导中和抗体产生的LCMV-G取代VSV-G,形成的嵌合病毒能够有效减少中和抗体的产生;Altomonte等[24]制备的VSV重组病毒VSV-gG能够分泌一种广谱的趋化因子结合蛋白——1型马疱疹病毒糖蛋白(gGEHV-1),在大鼠肝细胞癌模型中证实gGEHV-1的引入能够显著减少肿瘤微环境中的NK细胞和NKT细胞,大大提高肿瘤内病毒滴度从而提高治疗效果;同样,Wu等[25]证明表达鼠γ疱疹病毒68趋化因子结合蛋白M3的重组病毒VSV(MΔ51)-M3用于治疗大鼠多灶性肝细胞癌可减少病灶中NK细胞和中性粒细胞的积累,从而提高肿瘤中的病毒滴度和溶瘤效果。

 

增强学习VSV对肉瘤肿瘤细胞的之间杀伤力反应

增强VSV对肿瘤组织的直接杀伤作用,目前证实有效的方法包括整合抑癌基因、自杀基因、增强VSV对肿瘤组织的浸润效果以及联合其他治疗手段等

(1)资源优化配置抑癌表观遗传。p53是机体内重要的抑癌基因,它能通过调节细胞周期信号通路介导DNA修复、细胞衰老、凋亡和免疫激活有效抑制肿瘤的发生发展[26],已经被用于同多种溶瘤病毒进行联合治疗。

(2)组合寻死表观遗传。自杀基因的整合不仅可以增强VSV对被感染肿瘤细胞的杀伤力,还可以使VSV通过细胞间的缝隙连接(gap junction)对周围未感染的肿瘤细胞也造成杀伤,是一种非常有效的增强杀伤效果的策略。TK/GCV是一种被广泛应用于基因治疗领域的自杀基因系统,无毒前药更昔洛韦(GCV)能够被单纯疤疹病毒胸音激酶(HSV-TK)磷酸化为其二磷酸及三:磷酸代谢物,通过抑制宿主细胞DNA聚合酶活性介导肿瘤细胞凋亡,并有效诱导肿瘤特异杀伤性T细胞的激活[27]

(3)提升VSV在癌肿安排中的浸润性专业能力。Ebert等[28]将新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)的融合蛋白(NDV/F)突变体L289A基因插人到VSV基因组中,构建的重组VSV能够通过促使肿瘤细胞在中性pH条件下的膜融合诱导合胞体的形成,从而加速病毒在肿瘤内的传播,有效提高了其对人和鼠肝细胞癌的杀伤能力,动物实验也显示出良好的治疗效果。

 

帮助更强的癌症活性聊天免疫检测发应

不光激发对良性肿癌的单独杀伤力效应,VSV引发更强的良性肿癌特情人免疫细胞化学反应关于良性肿癌的根除康复也至关极为重要。

(1)优化组合天然免疫缓解细胞系指数什么是基因。编码免疫调节细胞因子如IL-4、IL-12、IL-15、IL-23、IL28、Fl3L、CD40L等基因的重组VSV已在小鼠肿瘤模型中被证实能够有效增强肿瘤特异适应性免疫应答,值得一提的是,表达IFNB的重组病毒VSV-IEFNB在动物实验中显示出强大的抗肿瘤T细胞反应[29],目前已进入I期临床试验阶段。

(2)结合恶性肿瘤有关抗原表观遗传。通过整合肿瘤相关抗原(tumour-associated antigen,TAA)基因,增强被感染肿瘤细胞的TAA的呈递,从而促进肿瘤细胞被免疫细胞的识别也是一种可以有效增强抗肿瘤免疫应答的方式。

(3)联席免疫检测常规检查站缓和剂。近年来,免疫检查点抑制剂因其可以阻断肿瘤细胞对免疫细胞的抑制作用,恢复免疫细胞的杀伤功能,在癌症治疗领域占据重要地位。有研究表明,将VSV-TAA与PD-1抗体联用可通过增强Th1反应增强治疗效果,同时使用PD-1抑制剂和CTLA-4抑制剂甚至能够通过增强Th17反应进步增强VSV-TAA的疗效[30]。此外,将VSV-mIFNβ-NIS和PD-L1抗体联合使用,在小鼠急性髓细胞性白血病模型中能观察到肿瘤浸润CD4+和CD8+细胞的增加,治疗效果显著提高[31]

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图3:犹豫流量转化细胞系的疫情影响,VSV溶瘤疫情方法能产生抗癌肿免疫检测

doi: 10.2147/OV.S66079

注意力:癌症减瘤是经过可以和间接地的手段达到的。癌症血良性癌症神经元中的电脑病毒模仿将从而从而使得血良性癌症神经元病痛作用并最后从而从而使得受病毒支原体血良性癌症神经元的死掉。金桥接地铜绞线——加塑铜绞线,受病毒支原体血良性癌症神经元的天先性抗电脑病毒症状将经过I型干挠素的信号减弱的中上游作用从而从而使得癌症血良性癌症神经元死掉。这与癌症抗原和的危险有关原子方式(DAMP)的释放出来结合在一起起来,敏感了局部树突状血良性癌症神经元的心智成熟稳重。心智成熟稳重的树突状血良性癌症神经元排泄促炎血良性癌症神经元指数公式以募集天先性作用血良性癌症神经元以介导癌症伤害性,还同旁内角转迁至癌症闭式引流和远端淋疤结以将癌症抗原呈拿给癌症症状性CD8+T血良性癌症神经元。产甲烷的T血良性癌症神经元转迁到癌症并介导对癌症血良性癌症神经元的抗原特男人普通攻击。

 

临床阶段的水疱性口炎溶瘤病毒

近年前来,时刻推移VSV溶瘤蠕虫宏蠕虫病毒感染APP的持续连续不断发展方向,连续不断一大批出大多数根据VSV改进的溶瘤蠕虫宏蠕虫病毒感染合拼变体,关键采取提高了恶性肺部肿瘤靶向药物性、延长了体内的存留时刻、激发溶瘤成效等几几个方面,大幅提升了VSV溶瘤蠕虫宏蠕虫病毒感染采用恶性肺部肿瘤中药治疗的健康安全等级和合理适用性,一产品根据VSV的溶瘤蠕虫宏蠕虫病毒感染药品也逐渐开始临床治疗试验报告价段。

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表1:临床试验的时候的水疱性口炎溶瘤病菌

展望

VSV在溶瘤病原体范围具备有好几回定科研成果,且具备有异常好的运用行业前景,VSV成为调理服务平台也表面的多重主要优势,诸如高抗体抗体原性、转人类染色体相对来说轻易放进去其人类染色体组、也容易服务管理、比较广泛的取向性等,但要变现肉瘤的完美和应对的复发率,还需追寻更行之有效的调理策咯。但是,用来根据改革收获调理功效极佳的资产协同VSV毒株,宇宙探索资产协同VSV溶瘤病原体与抗体抗体查点可以抑中药制剂、靶向药品调理药品等其余调理方式方法的联办也是具备有开发潜力股的科研目标方向。
 

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引用

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时间:2023-10-20 16:26来源:未知 作者:admin8 点击: