稳转细胞株构建服务

简介

稳转细胞株定制服务是将外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的蛋白,称稳转细胞株。
稳转细胞株定制服务构建的细胞系可直接应用于各种下游的生物学研究,包括基因功能研究、蛋白质工程、重组抗体制备、药物研发等。稳转细胞株定制服务包括基因过表达(Reporter细胞系、GPCR细胞系、离子通道细胞系等)、Knockdown、Knockout细胞系等。
 

特点

1、适用范围广,可用于各种哺乳动物细胞
2、稳定:保证15代以内稳定转染细胞稳定表达。
3、迅速:最快可控制在1个月以内完成构建。
4、质量保证:对外源基因进行严格鉴定。
 

技术路线

筛选稳定细胞株的两种方法

1、质粒转染单克隆筛选稳转细胞株
对大多数细胞转染效率较低。对于基因过表达,如果转染效率达到40%,基因过表达尚可。但是对于基因干扰实验,对转染效率要求远远高于基因过表达,通常质粒转染无法满足。
另外,质粒游离于细胞质中,很快降解,无法满足较长时间的检测项目;质粒转染整合几率极低,稳定细胞株构建耗时耗力,且得率很低,往往需要挑取单克隆株。
2、病毒转导筛选稳转细胞株
病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效,是目前主流的稳转细胞株筛选方法。用慢病毒制备稳转细胞株,由于其高效整合、高效转录、高效表达、宿主范围广,感染效率高,且与细胞染色体整合而不发生基因重排,是制备稳转细胞株的理想载体。
 

服务类别

1、基因过表达稳转细胞株;
2、基因敲低(Knockdown)稳转细胞株;
3、基因敲除(Knockout)稳转细胞株。

应用

1、药物筛选:GPCR细胞系、离子通道细胞系;
2、基因功能研究;
3、重组蛋白制备、抗体制备等。

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